作者：张毅                           

    随着人们食品安全意识的增强，食品及食品包装材料的安全性日益受到人们的关注。我国《食品包装用原纸卫生管理办法》中规定，食品包装用原纸禁止添加焚光增白剂等有害助剂[10] 。国家食品卫生标准也规定：食品包装材料不得检出突光性物质，以此来规范食品接触材料的生产和消费者的健康[11]。

    以市场上最有代表性的荧光增白剂VBL、APC为研究对象，探索利用高效液相色谱法同时检测两种荧光增白剂，考察食品接触材料中限用荧光增白剂在不同食品模拟物中的迁移规律，以期对食品接触材料中荧光增白剂VBL和APC的控制提供参考。

1  材料与方法

1.1材料与试剂

    食品接触材料，一次性纸杯：市售；VBL和APC标准品（纯度≥99.8%）：美国sigma公司；色谱纯级甲醇；乙醇、乙腈等试剂，分析纯；超纯水。

1.2试验仪器与设备

    WFH-203三用紫外分析仪：上海精科实业有限公司；P 120-W超纯水仪：长沙科源仪器有限公司；Agilent 1200高效液相色谱仪（配G1311A四元泵、G1322A真空脱气机、G1329A自动进样器、G1316A柱温箱、G13 21A荧光检测器）：美国Agilent公司；AQ-C18色谱柱：月旭材料科技有限公司等。

1.3试验方法

1.3.1样品的筛选

    避光下将选取纸杯置于紫外分析仪下，分别在254和365 nm的紫外光下，选择材料表面有可见紫色或蓝紫色荧光的试样，剪成<1 cm2的碎末状纸屑，混匀备用。

1.3.2样品前处理方法

    称取约1g混匀后的试样，放人150 mL磨口三角瓶中，加入25 mL提取溶剂，将三角瓶，于一定条件下处理。将提取液转移至50 mL容量瓶中，再加入10 mL提取溶剂重复上述提取步骤2次。待提取液冷却后，合并3次提取液，并用提取溶剂定容至50 mL，涡旋处理30 s使提取液充分混匀。吸取5 mL提取液，于5 000 r/min离心20 min，取上清液供HPLC分析检测，计算试样中荧光增白剂浓度。

    荧光增白剂浓度的计算按照式(1)。

    荧光增白剂浓度(ug/g)=上机浓度(ug/mL)×定容体积( mL)／纸杯质量(g)    (1)

1.3.3标准溶液配制

    精确称取重结晶后的VBL和APC标品各0.1 g，用水稀释至100 mL的棕色容量瓶中，从而得1 000ug /mL的标准储备液。然后逐级稀释得标准浓度溶液，吸取1 mL标准液至100 mL容量瓶中，定容至刻度得10 Vg/mL的标准使用液。在6只50 mL的容量瓶中分别取标准

使用液0.1，0.4，0.5，1，2和4 mL，并用水稀释至刻度，则得到荧光增白剂VBL和APC浓度分别为0.02，0.08，0.1，0.2，0.4和0.8ug/mL的标准溶液，进行HPLC分析检测并计算其回收率。

1.3.4高效液相色谱条件

    采用月旭AQ-C18（250 mm×4.6 mm，5um）色谱柱；荧光检测器激发波长362 nm，发射波长430 nm；柱温35℃；以甲醇和水为流动相；流速1.0 mL/min；进样量10 uL；梯度洗脱程序：初始，流动相甲醇与水体积比25：75; 3.0 min，甲醇与水体积比65：35；4.0 min，甲醇与水体积比70：30；5.0 min，甲醇与水体积比95：5。

1.3.5荧光增白剂迁移试验

1.3.5.1食品介质对荧光增白剂迁移的影响

    选用水、乙酸、乙醇和正己烷作为食品模拟物，于30℃下浸泡2h，用高效液相色谱仪分别测量VBL和APC溶出量。

1.3.5.2 pH对荧光增白剂迁移的影响

    以醋酸和碳酸氢钠调节超纯水的pH到5，6，7，8和9，再于30 0C下浸泡2h，用高效液相色谱仪分别测量VBL和APC溶出量。

1.3.5.3温度对荧光增白剂迁移的影响

    以pH为7的纯水为介质，分别于10 0C，200C，30℃，40 0C和50℃下浸泡2h，用高效液相色谱仪分别测量VBL和APC溶出量。

1.3.5.4处理时间对荧光增白剂迁移的影响

    以pH为7的纯水为介质，于30℃下分别浸泡1，2，3，4和5h，用高效液相色谱仪分别测量VBL和APC溶出量。

2结果与讨论

2.1  标准曲线的绘制

    按照1.3.3方法分别配制荧光增白剂VBL和APC的质量浓度为0.02，0.08，0.1，0.2，0.4和0.8 ug/mL的系列标准溶液，进行HPLC分析检，以峰面积(y)对质量浓度(x)进行线性回归分析，分别得到荧光增白剂VBL和APC的标准曲线。荧光增白剂VBL的标准曲线回归方程为y=5.21x+9.03（R2=0.999），荧光增白剂APC的标准曲线回归方程为y=4.69x+2.38

（R2=0.998），表明在0.02~0.8ug /mL的范围内，有良好的线性关系，可以采用该方法来进行在此质量浓度范围内进行荧光增白剂VBL和APC的检测。

    回收率测定采用0.04，0.4和0.8ug /mL的3种质量浓度（分别代表低，中，高质量浓度）添加到包装试样上，然后于30℃下浸泡2h，用高效液相色谱仪测定其含量。每样平行测定6次，测定值扣除样品空白后，计算回收率。结果表明低、中、高3个添加水平的加标回收率均在78%~90%之间，3种加标质量浓度测定值的相对标准偏差RSD均小于3%，说明该法具有较好的准确性和重复性。

2.2食品介质对荧光增白剂迁移的影响

    选用水、乙酸、乙醇和正己烷作为食品模拟物，分别称取约1g混匀后的试样，放入150 mL磨口三角瓶中，加入25 mL食品模拟物提取溶剂，将三角瓶于300C下浸泡2h处理。将提取液转移至50 mL容量瓶中，再加入10 mL提取溶剂重复上述提取步骤2次。待提取液冷却后，合并3次提取液，并用提取溶剂定容至50mL,涡旋处理30s使提取液充分混匀。吸取5 mL提取液，于5 000 r/min离心20 min．取上清液供HPLC分析检测，计算试样中荧光增白剂浓度，用高效液相色谱仪分别测量VBL和APC溶出量。食品介质对荧光增白剂VBL和APC迁移的影响如图1所示。

    从图1中可以看出，荧光增白剂VBL和APC在4种模拟物中的迁移量都是VBL溶出量比较多，这也与文献报道的荧光增白剂VBL在食品包装中存在更为普遍一致[4]。在相同食品模拟物条件下，荧光增白剂VBL和APC在4种模拟物中的迁移量多少顺序排列为：乙醇>正己烷>乙酸>水。

2.3 pH对荧光增白剂迁移的影响

    以醋酸和碳酸氢钠调节超纯水的pH到5，6，7，8和9作为食品模拟物，分别称取约1g混匀后的试样，放入150 mL磨口三角瓶中，加入25 mL食品模拟物提取溶剂，将三角瓶于30 0C下浸泡2h处理。将提取液转移至50 mL容量瓶中，再加入10 mL提取溶剂重复上述提取步骤2次。待提取液冷却后，合并3次提取液，并用提取溶剂定容至50 mL，涡旋处理30 s使提取液充分混匀。吸取5 mL提取液，于5 000 r/min离心20 min，取上清液共HPLC分-析检测，计算试样中荧光增白剂浓度，用高效液相色谱仪分别测量VBL和APC溶出量。pH对荧光增白剂VBL和APC迁移的影响如图2所示。

    从图2中可以看出，随着浸泡液pH的增加，荧光增白剂VBL和APC的迁移溶出量都出现增加的趋势。日常生活中，消费者会接触到酸性或碱性食物。这些酸、碱性介质会影响食品包装材料中荧光增白剂的迁移溶出，或者说是对荧光增白剂的检测或表征有极大的影响。通常在没有缓冲溶液的条件下，荧光增白剂VBL和APC在酸性条件下的荧光强度明显下降；但碱性条件下，荧光强度会有所增强。原因是荧光增白剂、VBL和APC结构上都有磺酸基团的存在，所以在酸性条件下，荧光增白剂VBL和APC的水溶性变差，分子发生聚集，使溶液不再符合郎伯一比尔吸收定律，从而影响了荧光强度的表现。在碱性条件下，情况则刚好相反，碱性条件下荧光增白剂VBL和APC的水溶解性增强，从而荧光强度增加[5] 。

2.4温度对荧光增白剂迁移的影响

    以pH为7的纯水为作为食品模拟物，分别称取约1g混匀后的试样，放人150 mL磨口三角瓶中，加入25mL食品模拟物提取溶剂，将三角瓶分别于10 0C，200C, 30℃，40℃和50 ℃下浸泡2h处理。将提取液转移至50 mL容量瓶中，再加入10 mL提取溶剂重复上述提取步骤2次。待提取液冷却后，合并3次提取液，并用提取溶剂定容至50 mL，涡旋处理30 s使提取液充分混匀。吸取5 mL提取液，于5 000 r/min离心20 min，取上清液供HPLC分析检测，计算试样中荧光增白剂浓度，用高效液相色谱仪分别测量VBL和APC溶出量。温度对荧光增白剂VBL和APC迁移的影响如图3所示。

    从图3中可以看出，随着浸泡液温度的增加，荧光增白剂VBL和APC的迁移溶出量都出现增加的趋势。温度会影响传质速率，因此，在相同的条件下，改变浸泡温度，包装材料荧光增白剂的迁移量会受到影响。主要是由于温度升高会加速传质过程，荧光增白剂的迁移量会增大[8]。因此在实际消费环节中，含有荧光增白剂的包装材料尽量不要盛装高温的食品，防止可能存在的荧光增白剂迁移溶出到食品中，危害消费者的健康。

2.5处理时间对荧光增白剂迁移的影响

    以PH为7的纯水为介质，分别称取约1 g混匀后的试样，放人150 mL磨口三角瓶中，加入25 mL食品模拟物提取溶剂，将三角瓶于30 0C下分别浸泡1，2，3，4和5h处理。将提取液转移至50 mL容量瓶中，再加入10 mL提取溶剂重复上述提取步骤2次。待提取液冷却后，合并3次提取液，并用提取溶剂定容至50mL，涡旋处理30 s使提取液充分混匀。吸取5 mL提取液，于5 000 r/min离心20 min，取上清液供HPLC分析检测，计算试样中荧光增白剂浓度，用高效液相色谱仪分别测量VBL和APC溶出量。处理时间对荧光增白剂VBL和APC迁移的影响如图4所示。

    从图4中可以看出，随着处理时间的增加，荧光增白剂VBL和APC的迁移溶出量都出现增加的趋势，尤其浸泡时间到2h时，迁移溶出量会出现大的跳跃，并且随着时间延长，迁移量逐步增加。浸泡时间过长，会出现荧光增白剂结构转变，在光照下，VBL荧光增白剂的分子结构能够从低能态的反式结构转变为高能态的顺式结构，而顺式结构不能将所吸收的紫外光转换成可见光区的蓝光，致使荧光性失效，从而导致检测量减少[9] 。因此在实际消费过程中，消费者尽量不要选用含有荧光增白剂的纸杯；即使选用，也不要盛装食物过长，超过2h，以免造成危害。

3结论

食品包装中荧光增白剂可能会通过盛装食物而迁移溶出到食品中，其中和食品介质、介质的pH、处理温度、浸泡时间等性质都会对荧光增白剂VBL和APC的迁移溶出量有不同的影响。运用高效液相色谱法对食品包装材料中荧光增白剂VBL的检测和迁移溶出规律进行了探讨。建立了以VBL和APC为标准物质检测食品包装材料中荧光增白剂VBL和APC的检测方法，并对包装材料中荧光增白剂的迁移规律进行研究。结果表明，荧光增白剂VBL和APC在4种模拟物中的迁移量都是VBL溶出量比较多，随着浸泡液pH、浸泡液温度、处理时间的增加，荧光增白剂VBL和APC的迁移溶出量都出现增加的趋势。温度升高会使荧光增白剂的迁移溶出量增大；荧光增白剂VBL和APC在酸性条件下的荧光强会有所下降，而在碱性条件下其荧光强度会显著增强。

4摘要

采用高效液相色谱法，以XVBL和APC为标准物质建立了对食品包装材料中荧光增白剂的定量检测的方法。并对食品接触材料中荧光增白剂VBL和APC在纯水、乙酸、乙醇和正己烷等4种食品模拟物中的迁移规律进行了研究，研究荧光增白剂VBL和pAPC迁移溶出量与食品接触介质、pH、浸泡温度和处理时间等因素的关系。结果表明，荧光增白剂VBL和APC在4种食品模拟接触物中的迁移量都是VBL溶出量较多，并且随着浸泡液pH、浸泡液

温度、处理时间的增加，荧光增白剂VBL和pAPC的迁移溶出量都出现增加的趋势。